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單克隆抗體選擇性培養(yǎng)
日期：2024-11-21 09:02
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摘要：
1975年分子生物學(xué)家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上，創(chuàng)建立雜交瘤技術(shù)，他們把可在體外培養(yǎng)和大量增殖的小鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)抗原**后的純系小鼠B細(xì)胞融合，成為雜交細(xì)胞系，既具有瘤細(xì)胞易于在體外無(wú)限增殖的特性，又具有抗體形成細(xì)胞的合成和分泌特異性抗體的特點(diǎn)。將這種雜交瘤作單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)，可形成單細(xì)胞系，即單克隆。利用培養(yǎng)或小鼠腹腔接種的方法，便能得到大量的、高濃度的、非常均一的抗體，其結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的，而且在培養(yǎng)過(guò)程中，只要沒(méi)有變異，不同時(shí)間所分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)與機(jī)能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。
這項(xiàng)新技術(shù)從根本上解決了在抗體制備中長(zhǎng)期存在的特異性和可重復(fù)性問(wèn)題，可用于探討①蛋白質(zhì)的精細(xì)結(jié)構(gòu)；②**細(xì)胞亞群的表面新抗原；③組織相容性抗原；④**和**的放射**（或酶**）分析；⑤腫瘤的定位和分類；⑥純化微生物和寄生蟲(chóng)抗原；⑦****和與**結(jié)合的**-化學(xué)療法 (“導(dǎo)彈”療法,利用單克隆抗體與靶細(xì)胞特異性結(jié)合，將**帶至病灶部位。因此，單克隆抗體可直接用于人類**的診斷、預(yù)防、**以及**機(jī)制的研究，為人類惡性腫瘤的**診斷與****開(kāi)辟了廣闊前景。
選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細(xì)胞，一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中，未融合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，不能利用補(bǔ)救途徑合成DNA而死亡。 未融合的**細(xì)胞雖具有次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，但其本身不能在體外長(zhǎng)期存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從脾細(xì)胞獲得了次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶，并具有骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。
